Главная

Определение электрофоретической подвижности макрофагов. Оценка результатов

Определение электрофоретической подвижности макрофагов может рассматриваться как метод выявления клеточной гиперчувствительности, поскольку его данные коррелируют с данными реакции торможения миграции макрофагов у кроликов при экспериментальном аллергическом энцефаломиелите и у морских свинок, вакцинированных БЦЖ. Относительно значения MEM в качестве средства диагностики in vitro злокачественных опухолей имеются различные суждения. Полученное в MEM торможение скорости миграции макрофагов >6% рассматривается как положительный результат.

Тщательной стандартизацией условий постановки опыта можно снизить разброс результатов до 3%. Для большей надежности результатов лучше ориентироваться на значения 6% (2 сек). Иногда 0,5х106 лимфоцитов, антиген и 1х107 облученных (1 Дж) макрофагов морской свинки инкубируют в объеме 3 мл в течение 90 минут при комнатной температуре, после чего определяют электрофоретическую мобильность макрофагов. Облучение макрофагов должно предотвращать иммунологическое взаимодействие содержащихся в перитонеальном экссудате лимфоцитов морской свинки с исследуемыми лимфоцитами. Хотя такое взаимодействие полностью устранить не удается, облучение повышает чувствительность макрофагов к MSF.

Согласно исследованиям Shenton, большое количество антигенов, например РРД или экстракты тканей, содержащие 3 М KCI, могут быть использованы в непрямом тесте с применением таннизированных эритроцитов барана при условии, что количество индикаторных клеток будет увеличено до Зх107. При помощи MEM можно определять блокирующие сывороточные факторы. Для этого различное количество лимфоцитов инкубируют с испытуемым антигеном или проводят преинкубацию лимфоцитов с различными количествами сыворотки.

В качестве еще одной модификации MEM можно рассматривать (МЕМ)-СКЛ-тест, при помощи которого определяют степень гистосовместимости пары донор — реципиент (быстрая диагностика). При постановке этой пробы по 0,5х106 лимфоцитов донора и реципиента инкубируют 90 мин при комнатной температуре. Получаемые центрифугированием БНФ используются так же, как в непрямом тесте. Eckstein и соавт. подтвердили эти данные на коммерческой системе для безгелевого электрофореза. Через 60 минут инкубации БНФ от специальной культуры лимфоцитов (по 106 лимфоцитов, 3 ч, 37°С) с Зх106 индикаторных клеток можно наблюдать изменения электрофоретической мобильности индикаторных клеток по сравнению с нулевым стандартом. Данные MEM показывают высокое статистическое соответствие с результатами СКЛ.

Copyright © 2011-2012